RECONOCIMIENTO DE PRÓTIDOS

2.REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.

El reactivos del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Mechero.

4.Vasos de precipitados.

5.Pipeta.

6.Solución de HCl concentrado.

7.Alcohol etílico.

8.Solución de SO4Cu al 1%.

9.NaOH al 20%.

10.Clara de huevo o leche.

11.Solución de albúmina al 1-2%.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en un tubo de ensayo 3 mL de solución de albúmina al 1-2%.
-Paso II: Añadir 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%.
-Paso III: Añadir 3mL de solución de NaOH al 20%.
-Paso IV: Agitar para que se mezcle bien.

• RESULTADO:

La disolución se vuelve de color violeta.

RECONOCIMIENTO DE PRÓTIDOS

1.COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, alcohol,, ácidos, etc.

La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Mechero.

4.Vasos de precipitados.

5.Pipeta.

6.Solución de HCl concentrado.

7.Alcohol etílico.

8.Solución de SO4Cu al 1%.

9.NaOH al 20%.

10.Clara de huevo o leche.

11.Solución de albúmina al 1-2%.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad e clara de huevo o 2-3 mL de leche.

-Paso II: Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3 mL de HCL concentrado y al tercero 2-3 mL de alcohol etílico.

• RESULTADO:

En la disolución de leche con albúmina se observa que la albúmina se queda en la parte superior y la leche en la inferior.

En la disolución de leche con HCl no se distingue el HCl y la leche.

En el tubo que se puso al baño Marí solo se observa que la cantidad de leche es menor.

                                  LECHE + ALBÚMINA                          LECHE + HCl 

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

3.SOLUBILIDAD

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.

Por el contrario las, son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetoa, benceno, etc.

• MATERIALES NECESARIOS:

1. Tubos de ensayo.

2. Gradilla.

3. Varillas de vidrio.

4. Mechero.

5. Pipetas.

6. Solución de NaOH al 20%.

7. Solución de Sudán III.

8. Tinta china roja.

9. Éter.

10. Aceite de oliva.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Poner 2 mL de aceite en dos tubos de ensayo.
-Paso II: Añadir a uno de ellos 2 mL de agua y al otro 2 mL de éter.
-Paso III: Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.

• RESULTADO:

El aceite se ha disuelto en el éter y, no lo hace en el agua y el aceite subirá debido a su menor densidad.

ACEITE + ÉTER

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

2.TINCIÓN

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

MATERIALES NECESARIOS:

1. Tubos de ensayo.

2. Gradilla.

3. Varillas de vidrio.

4. Mechero.

5. Pipetas.

6. Solución de NaOH al 20%.

7. Solución de Sudán III.

8. Tinta china roja.

9. Éter.

10. Aceite de oliva.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2 mL de aceite.

-Paso II: Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III.

-Paso III: Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.

-Paso IV: Agitar los tubos y dejar reposar.

• RESULTADO:

En el tubo con Sudán III todo el aceite aparece teñido, mientras que en el tubo con tinta, ésta se irá al
fondo y el aceite no estará teñido.

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

1.SAPONIFICACIÓN

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos. Éstos se combinan con los iones sodio potasio del hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En los seres vivos, la hidrólisis delos triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.

• MATERIALES NECESARIOS:

1. Tubos de ensayo.

2. Gradilla.

3. Varillas de vidrio.

4. Mechero.

5. Vasos de precipitados.

6. Pipetas.

7. Solución de NaOH al 20%.

8. Solución de Sudán III.

9. Tinta china roja.

10. Éter.

11. Aceite de oliva.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de aceite y 2 mL de NaOH al 20%.

-Paso II: Agitar energéticamente y colocar el tubo al baño María de 20 a 30 minutos.

• RESULTADO:

Pasados los 20 o 30 minutos se pueden observar en el tubo 3 fases: 

-Una inferior clara que contiene la solución de sosa sobrante junto con la glicerina formada.

-Otra intermedia semisólida que es el jabón formado.

-Y una superior lipídica (de grasas) de aceite inalterado.

OBSERVACIÓN DE TEJIDOS VEGETALES

RAÍZ DICOTILEDÓNEA

COLÉNQUIMA ANGULAR

Es un tejido de sostén, fuerte y elástico

XILEMA

Está formado por células muertas rígidas que conducen la savia y sostienen la planta.

PECIOLO

Es el apéndice de la hoja de una planta por el cual se une al tallo.

OBSERVACIÓN DE TEJIDOS ANIMALES

TEJIDO MUSCULAR LISO

Compuesto por fibras musculares largas y delgadas con un único núcleo.

Se encuentra en órganos como el tubo digestivo o los vasos sanguíneos.

TEJIDO MUSCULAR ESTRIADO

Compuesto por fibras fusiformes y alargadas que contienen muchos núcleos celulares.

TEJIDO MUSCULAR CARDÍACO

Es un tejido muscular compuesto por fibras musculares estriadas ramificadas.

Las células cardíacas se reparan entre sí en medio de unas estructuras llamadas discos intercalares.

TEJIDO EPITELIAL PLURIESRATIFICADO

Formado por una o varias células unidas entre sí.

INTESTINO DELGADO

TEJIDO ÓSEO COMPACTO

Es un tejido especializado del tejido epitelial.
Está compuesto por células y componentes extracelulares calcificados que forman una matriz ósea.

TEJIDO NERVIOSO

Tejido que produce y transmite impulsos nerviosos y está formado por neuronas y células de apoyo o protección que poseen gran estabilidad y conductividad.

CARTÍLAGO HIALINO

Se encuentra sobre todo en las articulaciones.



CARTÍLAGO ELÁSTICO

Está presente en el oído interno, la laringe, las trompas de Eustaquio y la epiglotis. Contiene redes de fibras elásticas y fibras de colágeno.

PRUEBA DE LUGOL

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

La prueba de yodo es la reacción química usada para determinar la presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos, una solución de yodo-diyodo disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio que reacciona con almidón produciendo un color púrpura; este tipo de prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón como por ejemplo: patatas, pan o ciertos frutos.

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.

La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de estructura lineal, con enlaces´ALPHA´ (1-4), que forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada, con enlaces´ALPHA´    (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse presentando un color intermedio entre anaranjado o amarillo.

La hidrólisis del almidón es un proceso muy utilizado en la industria para producir glucosa a partir de almidón de determinados frutos o productos y esto se efectúa en tres pasos que son los siguientes:
 -Gelatinizacón:

-Dextrinificación.
-Sacarificación:

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Cuentagotas.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Meter las muestras con las que se quiere realizar la prueba en los tubos de ensayo.

-Paso II: Añadir 2 o 3 gotas de lugol a las muestras.

-Paso III: Mezclar el lugol con las muestras y observar el resultado, si la muestra no cambia de color                 es que no tiene almidón, si cambia, es que si tienen almidón.

• RESULTADO:

-Glucosa: No contiene almidón.

-Lactosa: No contiene almidón.

-Sacarosa: No contiene almidón.

PRUEBAS DE LUGOL Y FEHLING

-En esta práctica de laboratorio se procederá a hacer la prueba de lugol ( para saber si contienen almidón) y la prueba de fehling (para averiguar si contienen azúcares reductores) en distintos elementos: Galletas.

• MATERIALES NECESARIOS:

       1. Tubos de ensayo.
       2. Pipetas.
       3. Alcohol de quemar.
       4. Pinzas.
       5. Gradilla.
       6. Mechero.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Machacar el elemento utilizado y mezclarlo con agua.

-Paso II: Meter la mezcla en dos tubos de ensayo diferentes, uno para la prueba de lugol y elotropara                      la prueba de Fehling.

-Paso III-a): Para la prueba de lugol hay que añadir 2 o 3 gotas de lugol y obserbar el                                                     resultado, si la mezcla se vuelve oscura es que el elemento si                                                                       tiene almidón y por tanto el resultado de la prueba es positivo y si no                                                         cambia de color es que no tiene almidón y que el resultado es negativo

-Paso III-b): Para la prueba de Fehling hay que añadir a la mezcla 1 mL de Fehling A y                                         un mL de Fehling B, después hay que calentar la mezcla usando alcohol de                                               quemar hasta que se vuelva verde o rojo: Rojo indica que el elemento si                                                     tiene azúcares reductores y verde indica que no los tiene.

• RESULTADO:

         -Prueba de lugol: Negativo, es decir, no contienen almidón.
         -Prueba de Fehling: Positivo, es decir, si contienen azúcares reductores.