RECONOCIMIENTO DE PRÓTIDOS

2.REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.

El reactivos del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Mechero.

4.Vasos de precipitados.

5.Pipeta.

6.Solución de HCl concentrado.

7.Alcohol etílico.

8.Solución de SO4Cu al 1%.

9.NaOH al 20%.

10.Clara de huevo o leche.

11.Solución de albúmina al 1-2%.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en un tubo de ensayo 3 mL de solución de albúmina al 1-2%.
-Paso II: Añadir 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%.
-Paso III: Añadir 3mL de solución de NaOH al 20%.
-Paso IV: Agitar para que se mezcle bien.

• RESULTADO:

La disolución se vuelve de color violeta.