RECONOCIMIENTO DE PRÓTIDOS

2.REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.

El reactivos del Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas.

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Mechero.

4.Vasos de precipitados.

5.Pipeta.

6.Solución de HCl concentrado.

7.Alcohol etílico.

8.Solución de SO4Cu al 1%.

9.NaOH al 20%.

10.Clara de huevo o leche.

11.Solución de albúmina al 1-2%.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en un tubo de ensayo 3 mL de solución de albúmina al 1-2%.
-Paso II: Añadir 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%.
-Paso III: Añadir 3mL de solución de NaOH al 20%.
-Paso IV: Agitar para que se mezcle bien.

• RESULTADO:

La disolución se vuelve de color violeta.

RECONOCIMIENTO DE PRÓTIDOS

1.COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, alcohol,, ácidos, etc.

La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.

• MATERIALES NECESARIOS:

1.Tubos de ensayo.

2.Gradilla.

3.Mechero.

4.Vasos de precipitados.

5.Pipeta.

6.Solución de HCl concentrado.

7.Alcohol etílico.

8.Solución de SO4Cu al 1%.

9.NaOH al 20%.

10.Clara de huevo o leche.

11.Solución de albúmina al 1-2%.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad e clara de huevo o 2-3 mL de leche.

-Paso II: Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3 mL de HCL concentrado y al tercero 2-3 mL de alcohol etílico.

• RESULTADO:

En la disolución de leche con albúmina se observa que la albúmina se queda en la parte superior y la leche en la inferior.

En la disolución de leche con HCl no se distingue el HCl y la leche.

En el tubo que se puso al baño Marí solo se observa que la cantidad de leche es menor.

                                  LECHE + ALBÚMINA                          LECHE + HCl 

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

3.SOLUBILIDAD

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los lípidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñas gotas formando una emulsión de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por reagrupación de las gotas de grasa en una capa que, por su menor densidad, se sitúa sobre el agua.

Por el contrario las, son solubles en disolventes orgánicos, como el éter, cloroformo, acetoa, benceno, etc.

• MATERIALES NECESARIOS:

1. Tubos de ensayo.

2. Gradilla.

3. Varillas de vidrio.

4. Mechero.

5. Pipetas.

6. Solución de NaOH al 20%.

7. Solución de Sudán III.

8. Tinta china roja.

9. Éter.

10. Aceite de oliva.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Poner 2 mL de aceite en dos tubos de ensayo.
-Paso II: Añadir a uno de ellos 2 mL de agua y al otro 2 mL de éter.
-Paso III: Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.

• RESULTADO:

El aceite se ha disuelto en el éter y, no lo hace en el agua y el aceite subirá debido a su menor densidad.

ACEITE + ÉTER

RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

2.TINCIÓN

• FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

MATERIALES NECESARIOS:

1. Tubos de ensayo.

2. Gradilla.

3. Varillas de vidrio.

4. Mechero.

5. Pipetas.

6. Solución de NaOH al 20%.

7. Solución de Sudán III.

8. Tinta china roja.

9. Éter.

10. Aceite de oliva.

• PROCEDIMIENTO:

-Paso I: Disponer en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2 mL de aceite.

-Paso II: Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III.

-Paso III: Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.

-Paso IV: Agitar los tubos y dejar reposar.

• RESULTADO:

En el tubo con Sudán III todo el aceite aparece teñido, mientras que en el tubo con tinta, ésta se irá al
fondo y el aceite no estará teñido.